Guia de selecció d'aigua sense nucleases Es filtren tipus II de 18 megaohms (mitjançant filtració i desionització d'osmosi inversa d'última generació), seguida d'autoclau i filtració estèril.
Què fa l'aigua lliure de nucleases?
Per evitar la pèrdua de mostres d'ADN i ARN, és essencial que s'utilitzi aigua altament pura i lliure de nucleases en aplicacions com ara PCR, síntesi d'ADNc, purificació d'àcids nucleics, seqüenciació, i la clonació. … Els mètodes per eliminar les nucleases actives inclouen la filtració i el tractament amb dietilpirocarbonat (DEPC).
L'aigua lliure de nucleases és ultrapura?
L'aigua lliure de nucleases està lliure de DNAsa i RNAsa i implica tractar amb DEPC (dietilpirocarbonat) i/o autoclau per inactivar la RNAsa i la DNAsa. L'aigua ultrapura, en canvi, s'obté per ultrafiltració per aconseguir l' alt nivell de puresa. Tampoc conté cap nucleasa.
Pots fer aigua sense nucleases?
Totes les respostes (10) Afegiu 0,1% DEPC a MilliQ o aigua destil·lada doble; deixeu-ho reposar durant la nit a 37 °C i, a continuació, autoclau. Assegureu-vos que la cristalleria utilitzada també s'esbandeix amb la mateixa aigua o es tracta amb cloroform o es cou al forn d'aire calent (260 °C) durant 4 hores. Hauria d'estar llest per al seu ús: tant DNasa com RNasa gratuït
Quina diferència hi ha entre l'aigua sense nucleases i l'aigua sense RNases?
Aigua lliure de nucleases significa lliure de les dues nucleases. La DNasa normalment no és gaire estable. Es pot desactivar mitjançant vòrtex o escalfament, però les RNases són més estables. En cas de RT, utilitzeu aigua lliure de RNasa o aigua lliure de nucleases.