El test de complementació de fluorescència bimolecular (BiFC) és un mètode utilitzat per visualitzar directament la interacció proteïna-proteïna in vivo mitjançant imatges de cèl·lules vives o cèl·lules fixes de. … BiFC va ser descrit per primera vegada per Hu et al.
Com funciona la complementació de fluorescència bimolecular?
El principi de funcionament de BiFC es basa en el desenvolupament d'un complex fluorescent, com a resultat de l'associació de dos segments d'una proteïna fluorescent quan estan molt a prop a causa de la interacció proteïna-proteïna en els fragments, és a dir., a BiFC, un fluoròfor es divideix en extrems terminals amino i carboxil.
Què és la prova BiFC?
assaig de complementació de fluorescència bimolecular (BiFC) permet una visualització senzilla i directa de les interaccions de proteïnes a les cèl·lules vives (45). L'enfocament BiFC es basa en la formació d'un complex fluorescent quan dues proteïnes fusionades amb fragments no fluorescents d'una proteïna fluorescent interaccionen entre elles (Fig.
Per què es fa la prova BiFC?
La idea de BiFC és expressar meitats de GFP fusionades a les vostres proteïnes d'interès Si els PDI interactuen, podeu unir les dues meitats per obtenir una GFP funcional. Per tant, si hi ha la meitat d'una GFP expressada a la cèl·lula, no m'estranya que un anticòs GFP pugui detectar-la.
El BiFC és reversible?
La irreversibilitat dels complexos BiFC ha estat ben documentada (10), i sembla que la majoria, si no tots, els sistemes BiFC basats en proteïnes fluorescents són irreversibles (8, 33, 43, 48–51).
