Relacionats amb l'últim fenomen hi ha canvis en els temps de retenció que són causats per un augment de la contrapressió a la columna. L'augment de la contrapressió pot indicar una contaminació de la columna, però fins i tot una frita obstruïda pot afectar els temps de retenció.
Què causa el canvi de temps de retenció?
Una de les causes més comunes dels canvis en el temps de retenció en les separacions LC en fase inversa és un canvi menor en la concentració del dissolvent orgànic, normalment metanol o acetonitril Això pot ocorre per un error menor en la formulació o un canvi en la composició de la fase mòbil si un dissolvent s'evapora amb el temps.
Què augmenta el temps de retenció?
Si la polaritat de la fase estacionària i el compost són similars, el temps de retenció augmenta perquè el compost interacciona més fort amb la fase estacionària. Com a resultat, els compostos polars tenen temps de retenció llargs en fases estacionàries polars i temps de retenció més curts en columnes no polars amb la mateixa temperatura.
Quins factors influeixen en el temps de retenció?
El temps de retenció depèn de molts factors: condicions d'anàlisi, tipus de columna, dimensió de la columna, degradació de la columna, existència de punts actius com la contaminació. etcètera. Si citeu un exemple conegut, tots els pics apareixen en temps més curts quan talleu part de la columna.
Què afecta el temps de retenció a la cromatografia?
Un canvi en el programa de temperatura sovint provoca un canvi de temps de retenció de tots els pics. Un canvi en la temperatura inicial, el temps de retenció inicial o la velocitat de rampa poden afectar tots els pics. Els temps de retenció augmenten amb una temperatura inicial més baixa, un temps de retenció inicial més llarg o una velocitat de rampa més lenta.