Taula de continguts:
- El següent és una visió general dels diferents passos d'un protocol de tinció d'immunofluorescència indirecta
- Com es realitza la immunofluorescència?
- Com s'utilitza la immunofluorescència en una cèl·lula?
- Quin és un exemple d'immunofluorescència?
- Per a què serveix la tinció d'immunofluorescència?
Vídeo: Com fer la immunofluorescència?
2024 Autora: Fiona Howard | [email protected]. Última modificació: 2024-01-10 06:35
El següent és una visió general dels diferents passos d'un protocol de tinció d'immunofluorescència indirecta
- Planificació d'experiments i preparació de mostres. …
- Fixació de mostres. …
- Permeabilització cel·lular. …
- Bloqueig. …
- Incubació d'anticossos primaris. …
- Incubació d'anticossos secundària. …
- Contrataca i muntatge.
Com es realitza la immunofluorescència?
Tots els passos d'incubació tenen lloc a temperatura ambient
- Renteu les cèl·lules dues vegades i utilitzeu unes pinces per col·locar amb cura el cobreobjectes amb les cèl·lules cap amunt a la cambra humidificada.
- Reparar amb formaldehid al 4% durant 10 minuts i rentar 3 ×.
- Permeabilitzar amb un 0,1 % de TX-100/PBS durant 15-20 minuts i rentar 3 ×.
Com s'utilitza la immunofluorescència en una cèl·lula?
Protocol d'immunofluorescència per a cèl·lules adherents
- Llavor 1–1,5 x104 cèl·lules per pou d'un portaobjectes de 4 cambres en 500 ml de medi de cultiu. Incubar a 37 °C al 5% de CO2.
- 32–36 hores després de la sembra de cèl·lules, traieu el medi de cultiu cel·lular i esbandiu les cèl·lules 3 vegades amb 500 µL de 1X PBS.
Quin és un exemple d'immunofluorescència?
Per exemple, un investigador pot crear anticossos primaris en una cabra que reconeguin diversos antígens i, a continuació, emprar anticossos secundaris de conill acoblats amb colorants que reconeixen la regió constant d'anticossos de cabra ( anticossos anti-cabra de conill).
Per a què serveix la tinció d'immunofluorescència?
La tinció d'immunofluorescència (IF) és una tècnica àmpliament utilitzada en la investigació biològica i el diagnòstic clínic IF utilitza anticossos marcats amb fluorescència per detectar antígens objectiu específics. Seguida de la imatge, és una tècnica molt directa, ja que realment podeu veure alguna cosa.
Recomanat:
Què fer i no fer per mantenir-se segur en línia?
Les 10 regles de seguretat a Internet i què no s'ha de fer en línia Mantenir la informació personal de manera professional i limitada. … Mantenir la configuració de privadesa activada. … Practica la navegació segura. … 4. Assegureu-vos que la vostra connexió a Internet sigui segura.
Què fer i què no fer de gd?
Fés i no fer d'una discussió en grup. 1) Vesteix de manera formal. 2) No us precipiteu. 3) Mantingueu el contacte visual mentre parleu. 4) Permet que altres parlin. 5) No siguis agressiu. 6) Mantingueu una actitud positiva. 7) Parla amb prudència.
Què cal fer i no fer durant la preparació dels exàmens?
Estudiar per als exàmens: fer i no fer Tria el teu entorn d'estudi amb cura. Una zona oberta i ben il·luminada, amb una cadira vertical, és més beneficiosa. … Regula el teu temps d'estudi. … Revisió durant 15 minuts al final de cada dia.
Preferiria fer o fer?
Fem servir prefer o 'd prefer, seguit d'un infinitiu o d'un substantiu, per parlar de les preferències presents i futures: prefereixo anar-me sol. . Preferiria tenir significat? Tant "preferiria" com "preferiria"
Com reduir la tinció de fons en immunofluorescència?
Per reduir la unió d'anticossos no específics i, en conseqüència, reduir el senyal de fons, es recomana utilitzar una solució de bloqueig abans de la incubació amb anticossos La solució de bloqueig més eficaç serà sigui el que conté sèrum de la mateixa espècie en què es va generar l'anticossos secundari .
