Un pot congelar i descongelar el tampó RIPA 2-3 vegades sense perdre la seva potència sempre que s'emmagatzemi en gel durant el seu ús (20-30 min). Emmagatzemeu el tampó congelat a -80 graus C.
Quant de temps puc mantenir la memòria intermèdia RIPA?
1. Si s'utilitzarà contínuament el tampó, es recomana mantenir el tampó 10x a 4 °C durant 1-2 setmanes. Durant períodes de temps més llargs, el tampó s'ha d'emmagatzemar a -20 °C. Es recomana l'ús d'aliquotes del buffer 10x si es volen fer molts experiments petits.
Es pot emmagatzemar la memòria intermèdia RIPA?
El tampó RIPA preparat s'ha de dividir en alíquotes i emmagatzemar-se a −20 °C. Afegiu inhibidors de proteasa i/o fosfatasa a una alíquota descongelada abans de l'ús immediat. Un mil·lilitre de tampó és suficient per lisar aproximadament 5 milions de cèl·lules. …
Com emmagatzemen els lisats RIPA?
Feu servir els lisats preparats tan aviat com sigui possible i emmagatzemeu-los durant el menor temps possible. Emmagatzema els lisats a -80℃ durant el major temps possible. Per als lisats que s'hauran de conservar a llarg termini, transferiu els tubs acabats de preparar a un congelador disponible a -80 ℃ per evitar la degradació.
Com es descongela el buffer RIPA?
Després d'eliminar la solució de rentat final de les cèl·lules, afegiu un volum adequat de tampó RIPA (1 ml per 0,5 a 5 × 107 cèl·lules) al sediment de cèl·lules i barregeu o agiteu breument per resuspendre les cèl·lules completament. Incubar en gel o a la nevera (2-8 °C) durant cinc minuts.
